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大腸桿菌在表達蛋白過程中越來越少?

更新時間:2022-01-18點擊次數(shù):1482


大腸桿菌表達系統(tǒng)是目前應(yīng)用*泛地蛋白表達系統(tǒng)。它具有:遺傳背景清楚;易于培養(yǎng)和控制;轉(zhuǎn)化操作簡單;表達水平高;成本低;周期短等特點。同時是常用也是經(jīng)濟實惠的蛋白表達系統(tǒng),在基因表達技術(shù)中發(fā)展最早。

主要可能有兩種原因,一種是大腸在加入IPTG等誘導(dǎo)劑后大腸停止生長或者裂解,這時候我們要考慮蛋白本身對該菌是有一定毒性的,這時候我們可以選擇一些采用嚴(yán)緊控制的宿主菌株,比如帶有pLysS的菌株。另外一種原因就是很令人頭疼的了,當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)大面積搖瓶中細(xì)菌量逐漸降低甚至培養(yǎng)基回復(fù)到澄清狀態(tài),就應(yīng)該懷疑噬菌體污染的可能性了。

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